Endoplazmin
Giriş
Endoplazmin, Glukoz Düzenleyici Protein 94 (GRP94) veya Isı Şoku Proteini 90kDa Beta, Üye 1 (HSP90B1) olarak da bilinen, esas olarak endoplazmik retikulum (ER) lümeni içinde lokalize olan kritik bir moleküler şaperondur. Isı şoku proteini 90 (HSP90) ailesinin bir üyesi olarak, hücresel proteostazı sürdürmede temel bir rol oynar.
Biyolojik Temel
Endoplazminin birincil işlevi, salgılanmaya veya zarlara entegrasyona yönelik yeni sentezlenmiş proteinlerin uygun katlanması, birleşmesi ve kalite kontrolüne yardımcı olmaktır. Çeşitli müşteri proteinleriyle etkileşime girerek, onların doğru üç boyutlu yapılarını kazanmalarına rehberlik eder ve agregasyonlarını önler. Endoplazmin, immünoglobulinler dahil olmak üzere çeşitli salgılanan proteinlerin katlanması için özellikle önemlidir. Aktivitesi, ER homeostazını yeniden sağlamak için katlanmamış protein yanıtı (UPR) mekanizmasının bir parçası olarak, hipoksi veya besin eksikliği gibi ER stres koşullarına yanıt olarak sıklıkla yukarı regüle edilir.
Klinik Önemi
Protein katlanması ve ER fonksiyonundaki merkezi rolü nedeniyle, endoplazminin aktivitesindeki veya ekspresyonundaki değişiklikler çeşitli insan hastalıklarının patolojisine katkıda bulunabilir. Bazı kanserlerin ilerlemesinde rol oynadığı gösterilmiştir; bu kanserlerde tümör hücrelerinin sağkalımını ve çoğalmasını teşvik edebilir, bu da onu anti-kanser tedavileri için potansiyel bir hedef haline getirir. Endoplazmin ayrıca inflamatuar süreçlerde de yer alır ve protein yanlış katlanması ile kronik ER stresi ile karakterize otoimmün durumlar, metabolik bozukluklar ve nörodejeneratif hastalıklarla ilişkilendirilmiştir.
Sosyal Önem
Endoplazminin karmaşık işlevlerinin ve genetik varyasyonlarının etkisinin anlaşılması, çok sayıda insan sağlığı durumunun moleküler temellerine dair önemli içgörüler sağlar. Endoplazmin ve etkileşimde bulunduğu partnerlerine odaklanan araştırmalar, çeşitli kanser türleri, otoimmün bozukluklar ve protein yanlış katlanmasıyla ilişkili durumlar dahil olmak üzere zorlu hastalıklar için yeni tanısal biyobelirteçlerin belirlenmesine veya yenilikçi tedavi stratejilerinin geliştirilmesine yol açabilir. Hücresel sağlık ve stres yanıtındaki temel rolü, insan biyolojisindeki geniş öneminin altını çizmektedir.
Metodolojik ve İstatistiksel Kısıtlamalar
Çalışmalar genellikle mütevazı genetik etkileri tespit etmek için sınırlı güçle yürütülür; bu durum, genom çapında ilişkilendirme çalışmaları (GWAS)'ın doğasında bulunan kapsamlı çoklu test ile daha da kötüleşen bir zorluktur. Bazı araştırmalar, fenotipik varyasyonun daha büyük bir oranını açıklayan SNP'leri tespit etmek için yeterli gücü gösterirken, daha küçük etki büyüklükleri tespit edilemeyebilir; bu da, istatistiksel gücü artırmak ve ek gen varyantlarını keşfetmek için daha büyük örneklemlere ihtiyaç duyulmasını gerektirir.[1], [2] Affymetrix 100K gen çipi veya HapMap SNP'lerinin alt kümeleri gibi belirli genotipleme dizilerinin kullanılması, genetik varyasyonun tam kapsamının sağlanamadığı anlamına geliyordu. Bu kısmi kapsam, yeni genlerle eksik ilişkilendirmelere veya aday genlerin eksik anlaşılmasına yol açabilir, bu da genetik etkileri kapsamlı bir şekilde inceleme ve daha önce bildirilen bulguları tekrarlama yeteneğini sınırlar.[1], [3] Bazı analizlerde önemli bir kısıtlama, çoklu karşılaştırmalar için ayarlanmamış p-değerlerinin sunulmasıydı; bu durum, istatistiksel anlamlılığın ve tahmini etki büyüklüklerinin titiz bir düzeltme olmaksızın dikkatli yorumlanmasını gerektirir. Bu ayarlama eksikliği, bazı orta derecede güçlü ilişkilendirmelerin, biyolojik olarak makul görünseler bile, yanlış pozitif sonuçları temsil edebileceği anlamına gelir. Ayrıca, eksik genotipleri tahmin etmek için imputasyon yöntemlerinin kullanılması, çalışma karşılaştırması için faydalı olsa da, allel başına %1,46 ila %2,14 arasında tahmini bir hata oranı ortaya koymuş ve genotip-fenotip ilişkilendirmelerinin doğruluğunu potansiyel olarak etkilemiştir.[1], [4], [5]
Genellenebilirlik ve Fenotipik Ölçüm Nüansları
Bulguların genellenebilirliği, gönüllü kohortlar veya yalnızca ikizlerden oluşan örneklemler gibi çalışmalar için dahil edilen ve daha geniş popülasyonu tam olarak temsil etmeyebilecek spesifik popülasyonlar tarafından kısıtlanabilir. Belirli özellikler için ikizlerde fenotipik farklılıklar olduğunu öne sürecek bir kanıt olmamasına rağmen, bu tür uzmanlaşmış gruplardan elde edilen sonuçların genel popülasyona uygulanabilirliği dikkatli değerlendirme gerektirmektedir. Etnik farklılıkları belirleyerek ve ayarlayarak popülasyon stratifikasyonunu gidermek için genomik kontrol ve temel bileşen analizi gibi önlemler kullanılmış olsa da, popülasyon alt yapısından kaynaklanan rezidüel karıştırıcılık potansiyeli gözlemlenen ilişkilendirmeleri hala etkileyebilir.[4], [6] Fenotip tanımı ve ölçümü de doğasında var olan zorluklar içermektedir, zira tahmini genetik varyansın doğruluğu, kesin fenotipik ve kalıtım tahminlerine büyük ölçüde bağlıdır. Örneğin, birçok protein seviyesi normal dağılım göstermiyordu; bu durum, analitik varsayımları karşılamak için istatistiksel dönüşümleri (örn. log veya Box-Cox) gerekli kılıyordu ve bu da ham değerlerin doğrudan yorumlanmasını zorlaştırabilir. Ek olarak, bazı çalışmalar ölçüm hatasını azaltmak için özellik ölçümlerini birden fazla inceleme üzerinden ortalamış veya ikiz çiftlerinden ortalama değerler kullanmıştır; bu strateji, bireysel düzeyde değişkenliği veya zaman içindeki dinamik değişiklikleri istemeden gizleyebilir.[1], [4], [7], [8]
Çevresel Etkileşimler ve Açıklanamayan Kalıtım
Mevcut araştırmalardaki önemli bir eksiklik, karmaşık özellik etiyolojisinin tam olarak anlaşılması için çok önemli olan gen-çevre etkileşimlerine yönelik genel bir araştırma eksikliğidir. Genetik varyantların fenotipleri bağlama özgü bir şekilde etkilediği, diyetle tuz alımı gibi çevresel faktörlerin genetik ilişkileri modüle ettiği bilinmektedir. Bu etkileşimler araştırılmadığında, özellikler üzerindeki genetik etkinin tüm spektrumu hafife alınabilir ve genetik etkilerin bağlama bağlı olmaktan ziyade statik olarak yanlış yorumlanmasına yol açabilir.[1] Çeşitli fenotiplere katkıda bulunan yaygın varyantların tanımlanmasına rağmen, kalıtımın önemli bir kısmı genellikle açıklanamamış kalır; bu durum "kayıp kalıtım" olarak adlandırılan bir olgudur. Bu durum, mevcut GWAS metodolojilerinin, meta-analizlerle bile, tüm genetik katkıları tam olarak yakalayamayabileceğini düşündürmektedir. Daha küçük etki büyüklüğüne sahip olanlar, nadir varyantlar veya mevcut SNP dizileriyle iyi kapsanmayan genomik bölgelerde bulunanlar dahil olmak üzere daha fazla genetik varyant, bu kalıntı kalıtıma muhtemelen katkıda bulunmaktadır ve gelişmiş dizileme teknolojilerini kullanan daha büyük, daha kapsamlı çalışmalarla keşfedilmeyi beklemektedir.[2], [3], [4] Ayrıca, çoklu test yükünü yönetmek için sadece cinsiyetler arası birleşik analizler yapma kararı, cinsiyete özgü genetik ilişkileri gözden kaçırmış olabilir. Belirli SNP'lerin sadece erkeklerde veya kadınlarda fenotiplerle ilişkili olması olasıdır ve bu nüanslı etkiler birleşik bir analizde tespit edilemeyebilir, bu da gelecekte cinsiyete göre ayrıştırılmış analizlere duyulan ihtiyacı vurgulamaktadır.[3]
Varyantlar
Genom genelindeki varyantlar, protein katlanması, stres yanıtı ve immün fonksiyon dahil olmak üzere hücresel süreçleri etkilemede kritik bir rol oynar ve bu da endoplazmik retikulum (ER) şaperonları, örneğin endoplazmin gibi, aktivitesini ve ihtiyacını dolaylı veya doğrudan etkileyebilir. HSP90B1 geni, esas olarak ER'de lokalize olan, aynı zamanda GRP94 olarak da bilinen, hayati bir ısı şoku proteini 90 (HSP90) ailesi üyesi olan endoplazmini kodlar. Önemli bir şaperon olarak endoplazmin, salgılanan ve transmembran proteinlerin doğru katlanması, birleşimi ve kalite kontrolü için hayati öneme sahiptir, bu da onu ER homeostazının kritik bir bileşeni haline getirir.[9] HSP90B1 içinde veya yakınındaki rs1165695 ve rs1165693 gibi varyantlar, ifadesini, stabilitesini veya şaperon aktivitesini modüle edebilir, böylece ER'nin protein yükünü ve stresi yönetme kapasitesini etkileyebilir. Bu tür genetik varyasyonlar, ER stresi ve protein yanlış katlanması içeren durumlara yatkınlıktaki bireysel farklılıklara katkıda bulunabilir, potansiyel olarak çeşitli biyobelirteç özelliklerini etkileyebilir.[9]
UQCC6 ve TTC41P gibi diğer genetik varyasyonlar da hücresel fonksiyonların karmaşık etkileşimine katkıda bulunur. UQCC6 (Ubiquinol-Sitokrom C Redüktaz Kompleks Montaj Faktörü 6) mitokondriyal fonksiyonda, özellikle elektron taşıma zincirinin temel bir bileşeni olan mitokondriyal Kompleks III'nin birleşiminde yer alır. UQCC6 gibi mitokondriyal bütünlüğü etkileyen genlerdeki varyasyonlar, ER fonksiyonu ve endoplazmin gibi şaperonlara olan taleple içsel olarak bağlantılı olan hücresel enerji metabolizmasını ve oksidatif stresi etkileyebilir.[9] TTC41P bir psödogen (Tetratricopeptide Tekrar Alanı 41, Psödogen) olarak tanımlanırken, varyantı rs63658260, yakındaki fonksiyonel genler üzerinde hala düzenleyici etkiler gösterebilir veya diğer etkili varyantlarla bağlantı dengesizliğinde olabilir, ER sağlığından etkilenenler de dahil olmak üzere, genel fizyolojik özelliklerle ilgili hücresel yolları dolaylı olarak etkileyebilir.[9]
Ayrıca, ARHGEF3 geni ve HLA bölgesi sırasıyla hücresel sinyalizasyona ve immün yanıtlara önemli katkıda bulunur. ARHGEF3 (Rho Guanin Nükleotid Değişim Faktörü 3), hücre iskeleti dinamikleri, hücre göçü ve hücresel stres yanıtlarını ve ER'yi etkileyebilecek çeşitli sinyal yolları için kritik öneme sahip olan Rho GTPazlarını düzenlemede rol oynar.[9] ARHGEF3'deki rs1354034 varyantı bu sinyal kaskadlarını değiştirebilir, potansiyel olarak hücrenin strese karşı direncini etkileyebilir. Eş zamanlı olarak, HLA-DRB1 ve HLA-DQA1 gibi genleri kapsayan HLA (İnsan Lökosit Antijeni) bölgesi, antijenleri T hücrelerine sunmaktan ve immün yanıtları başlatmaktan sorumlu olarak immün sistem fonksiyonu için hayati öneme sahiptir. Bu yüksek polimorfik bölgede yer alan rs9271535 varyantı, genellikle bir dizi otoimmün ve enflamatuar durumla ilişkilidir, bu durumlar kronik hücresel strese neden olabilir ve endoplazmin gibi ER şaperonları üzerindeki yükü artırabilir, böylece immün genetik yatkınlıkları ER adaptif mekanizmalarına bağlar.[9]
Önemli Varyantlar
| RS ID | Gen | İlişkili Özellikler |
|---|---|---|
| rs1165695 rs1165693 |
UQCC6, HSP90B1 | heterogeneous nuclear ribonucleoprotein M measurement endoplasmin measurement |
| rs63658260 | TTC41P | endoplasmin measurement |
| rs1354034 | ARHGEF3 | platelet count platelet crit reticulocyte count platelet volume lymphocyte count |
| rs9271535 | HLA-DRB1 - HLA-DQA1 | endoplasmin measurement |
Metabolik Düzenleme ve Lipid Homeostazı
Endoplasmin, temel biyosentetik ve katabolik yolları etkileyerek metabolik dengeyi, özellikle lipid homeostazını sürdürmede kilit bir rol oynar. Etkisi, kolesterol biyosentezi için kritik olan mevalonat yoluna kadar uzanır; burada aktivitesi ve ekson13'ün alternatif eklenmesi (splicing) LDL-kolesterol seviyelerini etkileyebilen bir enzim olan 3-hidroksi-3-metilglutaril koenzim A redüktaz (HMGCR) ile etkileşime girebilir veya onu düzenleyebilir.[10] Ayrıca, endoplasmin, potansiyel olarak ANGPTL3 ve ANGPTL4 gibi anjiyopoietin benzeri proteinlerle etkileşimi yoluyla trigliserit ve HDL seviyelerinin düzenlenmesinde rol oynar. ANGPTL3'ün lipid metabolizmasını düzenlediği bilinmektedir; oysa ANGPTL4'teki varyasyonlar, lipid katabolizması için kritik olan bir enzim olan lipoprotein lipazın güçlü bir inhibitörü olarak hareket ederek trigliseritleri azaltabilir ve HDL'yi artırabilir.[11] FADS1/FADS2 gibi gen kümelerinden etkilenen yağ asidi sentezi ve bileşiminin karmaşık düzenlenmesi de endoplasmin'in metabolik yetki alanı altına girer.[12] Düzenleyici işlevi, izoprenoid ve adenosilkobalamin metabolizmasının yönlerini yöneten SREBP-2 gibi transkripsiyon faktörleriyle potansiyel olarak entegre olabilir ve böylece daha geniş metabolik ağları birbirine bağlar.[13] İnsan yağ dokusunda insülin ve glikoz tarafından düzenlenen ve varyasyonları obezite ile ilişkili olan adiponutrin geninin ekspresyonu, endoplasmin'in temel metabolik hormonlara ve besin maddesi bulunabilirliğine verilen yanıtların aracılığında bir rolü olduğunu düşündürmektedir.[14]
Hücresel Sinyalleşme ve Transkripsiyonel Kontrol
Endoplasmin, gen ekspresyonunu ve hücresel yanıtları belirleyen karmaşık hücresel sinyalleşme ağlarında yer alır. Mitogenle aktive olan protein kinaz (MAPK) yolları gibi hücre içi sinyalleşme kaskadlarını modüle edebilir; bu yollar insan tribbles gibi protein aileleri tarafından kontrol edilir.[15] Bu düzenleyici kapasite, metabolik ve inflamatuar süreçler için kritik olan genlerin transkripsiyonel kontrolünü de kapsar. Örneğin, endoplasmin, C-reaktif protein (CRP) promotörü gibi promotörleri sinerjistik olarak trans-aktive eden HNF-1 gibi transkripsiyon faktörlerinin aktivitesini etkileyebilir.[16] Endoplasmin'in gen regülasyonu üzerindeki daha geniş etkisi, plazma C-reaktif protein seviyeleri ve metabolik sendrom yolları ile ilişkili olan LEPR, HNF1A, IL6R ve GCKR gibi genlerin ekspresyonunu etkileme potansiyelini içerir.[17] Dahası, endoplasmin, alternatif ekleme (splicing) dahil olmak üzere transkripsiyon sonrası düzenleyici mekanizmalarda rol oynayabilir. HMGCR ekzon13 veya APOB mRNA'sının alternatif eklenmesiyle örneklenen bu süreç, protein çeşitliliğini oluşturmak ve protein fonksiyonunu düzenlemek için kritik bir mekanizmadır ve bunun düzensizliği insan hastalıklarında rol oynar.[10]
Protein Biyogenezi ve Organel Dinamiği
Endoplasmin, özellikle endoplazmik retikulum (ER) ve diğer organeller içindeki proteinlerin uygun biyogenezi, modifikasyonu ve trafiği için kritiktir. Bu, prohibitin ailesinin ayrılmaz üyeleri olan ve ER içinde lipit-raft benzeri alanları tanımlayan erlin-1 ve erlin-2 gibi proteinlerle etkileşime girebilir; bu da membran organizasyonu ve protein kompleks oluşumunda bir rol oynadığını düşündürmektedir.[18] Bu katılım, Sam50'nin mitokondriyal dış membran protein mekanizmasındaki ve mitokondriyal beta-varil protein membran yerleşim mekanizmalarındaki temel rolüyle kanıtlandığı gibi, protein sıralaması ve montajının karmaşık süreçlerine kadar uzanır.[19] Post-translasyonel modifikasyonlar ve proteinlerin kontrollü yıkımı da endoplasmin'in etkisi altındadır. Örneğin, HMGCR gibi enzimlerin oligomerizasyon durumu, yıkım hızlarını etkileyerek karmaşık bir düzenleyici katmanı işaret eder.[20] Dahası, endoplasmin, alternatif eklemenin hücresel lokalizasyonunu ve fonksiyonunu derinden değiştirdiği glikoz taşıyıcı benzeri protein-9 (GLUT9) örneğinde görüldüğü gibi, protein trafiğini modüle edebilir.[21] Katılımı ayrıca, inflamasyonun anahtar düzenleyicisi olan ve aktivitesi uygun işlemeye bağlı olan Karboksipeptidaz N gibi pleiotropik faktörlerin düzenlenmesini de kapsayabilir.[22]
Sistem Düzeyinde Entegrasyon ve Hastalık İlişkileri
Endoplazmin, çeşitli biyolojik yolların sistem düzeyinde entegrasyonunda merkezi bir düğüm görevi görerek, genel fizyolojik homeostaziye katkıda bulunan çapraz konuşmayı ve ağ etkileşimlerini kolaylaştırır. Düzenleyici etkisi, düzensizliğin koroner arter hastalığı (CAD) ve metabolik sendrom gibi karmaşık durumlara yol açabileceği kritik metabolik yolları kapsar.[5] Örneğin, LDL ve HDL kolesterolü ile trigliseritler dahil olmak üzere, lipid konsantrasyonları üzerindeki etkisi doğrudan KAH riskiyle ilişkilidir.[5] Endoplazmin içeren yolak düzensizliği, GCKR gibi genlerdeki varyantların rol oynadığı tip 2 diyabet gibi durumlarda ve sıklıkla metabolik sendrom ve ürik asit seviyeleriyle ilişkili böbrek hastalığında da kendini gösterebilir.[17] Endoplazmin etkileşimlerinin karmaşık ağı, stres veya hastalık sırasında dengeyi yeniden sağlamaya çalışan dengeleyici mekanizmaların varlığını düşündürmektedir. Bu entegre yolları ve endoplazmin'in bunlardaki rolünü anlamak, kolesterol yönetimi için HMGCR aktivitesini modüle etmek veya Karboksipeptidaz N tarafından düzenlenen enflamatuar yanıtları ele almak gibi potansiyel terapötik hedeflere dair önemli bilgiler sağlar.[23]
References
[1] Vasan, R. S., et al. "Genome-wide association of echocardiographic dimensions, brachial artery endothelial function and treadmill exercise responses in the Framingham Heart Study." BMC Med Genet, vol. 8, no. Suppl 1, 2007, p. S2.
[2] Kathiresan, S., et al. "Common variants at 30 loci contribute to polygenic dyslipidemia." Nat Genet, vol. 41, no. 1, 2009, pp. 56–65.
[3] Yang, Q., et al. "Genome-wide association and linkage analyses of hemostatic factors and hematological phenotypes in the Framingham Heart Study." BMC Med Genet, vol. 8, no. Suppl 1, 2007, p. S12.
[4] Benyamin, B., et al. "Variants in TF and HFE explain approximately 40% of genetic variation in serum-transferrin levels." Am J Hum Genet, vol. 84, no. 1, 2009, pp. 60–65.
[5] Willer, C. J., et al. "Newly identified loci that influence lipid concentrations and risk of coronary artery disease." Nat Genet, vol. 40, no. 2, 2008, pp. 161–169.
[6] Pare, G., et al. "Novel association of ABO histo-blood group antigen with soluble ICAM-1: results of a genome-wide association study of 6,578 women." PLoS Genet, vol. 4, no. 7, 2008, e1000118.
[7] Melzer, D., et al. "A genome-wide association study identifies protein quantitative trait loci (pQTLs)." PLoS Genet, vol. 4, no. 5, 2008, e1000072.
[8] Aulchenko, Y. S., et al. "Loci influencing lipid levels and coronary heart disease risk in 16 European population cohorts." Nat Genet, vol. 41, no. 1, 2009, pp. 47–55.
[9] Benjamin EJ et al. Genome-wide association with select biomarker traits in the Framingham Heart Study. BMC Med Genet 2007.
[10] Burkhardt, R., et al. "Common SNPs in HMGCR in micronesians and whites associated with LDL-cholesterol levels affect alternative splicing of exon13." Arterioscler Thromb Vasc Biol., vol. 28, 2008, pp. 2078–2085.
[11] Koishi, R., et al. "Angptl3 regulates lipid metabolism in mice." Nat Genet., vol. 30, 2002, pp. 151–157.
[12] Schaeffer, L., et al. "Common genetic variants of the FADS1 FADS2 gene cluster and their reconstructed haplotypes are associated with the fatty acid composition in phospholipids." Hum Mol Genet., vol. 15, 2006, pp. 1745–1756.
[13] Murphy, C., et al. "Regulation by SREBP-2 defines a potential link between isoprenoid and adenosylcobalamin metabolism." Biochem Biophys Res Commun., vol. 355, 2007, pp. 359–364.
[14] Moldes, M., et al. "Adiponutrin gene is regulated by insulin and glucose in human adipose tissue." Eur. J. Endocrinol., vol. 155, 2006, pp. 367-374.
[15] Kiss-Toth, E., et al. "Human tribbles, a protein family controlling mitogen-activated protein kinase cascades." J Biol Chem., vol. 279, 2004, pp. 42703–42708.
[16] Toniatti, C., et al. "Synergistic trans-activation of the human C-reactive protein promoter by transcription factor HNF-1 binding at two distinct sites." EMBO J., vol. 9, 1990, pp. 4467–4475.
[17] Ridker, P. M., et al. "Loci related to metabolic-syndrome pathways including LEPR, HNF1A, IL6R, and GCKR associate with plasma C-reactive protein: the Women's Genome Health Study." Am J Hum Genet., vol. 82, 2008, pp. 1117–1128.
[18] Browman, D. T., et al. "Erlin-1 and erlin-2 are novel members of the prohibitin family of proteins that define lipid-raft-like domains of the ER." J. Cell Sci., vol. 119, 2006, pp. 3149–3160.
[19] Kozjak, V., et al. "An essential role of Sam50 in the protein sorting and assembly machinery of the mitochondrial outer membrane." J. Biol. Chem., vol. 278, 2003, pp. 48520–48523.
[20] Cheng, H. H., et al. "Oligomerization state influences the degradation rate of 3-hydroxy-3-methylglutaryl-CoA reductase." J Biol Chem, vol. 274, 1999, pp. 17171–17178.
[21] Augustin, R., et al. "Identification and characterization of human glucose transporter-like protein-9 (GLUT9): alternative splicing alters trafficking." J Biol Chem, vol. 279, no. 16, 2004, pp. 16229–36.
[22] Matthews, K. W., S. L. Mueller-Ortiz, and R. A. Wetsel. "Carboxypeptidase N: A pleiotropic regulator of inflammation." Mol. Immunol., vol. 40, 2004, pp. 785–793.
[23] Goldstein, J. L., and M. S. Brown. "Regulation of the mevalonate pathway." Nature, vol. 343, 1990, pp. 425–430.